液氮超低溫保藏技術(shù)是將菌種保藏在-196 ℃的液態(tài)氮，或在-150 ℃的氮?dú)庵械拈L(zhǎng)期保藏方法,，它的原理是利用微生物在-130 ℃以下新陳代謝趨于停止而有效地保藏微生物,。液氮罐廠家介紹其操作步驟如下：查特杜瓦瓶

1、安瓿管或凍存管的準(zhǔn)備

用圓底硼硅玻璃制品的安瓿管,，或螺旋口的塑料凍存管,。注意玻璃管不能有裂紋。將凍存管或安瓿管清洗干凈,，121 ℃下高壓滅菌(15～20) min,，備用。

2,、保護(hù)劑的準(zhǔn)備

保護(hù)劑種類(lèi)要根據(jù)微生物類(lèi)別選擇,。配制保護(hù)劑時(shí)，應(yīng)注意其濃度,，一般采用10 %～20 %甘油,。

液氮超低溫保藏技術(shù)簡(jiǎn)介

3、微生物保藏物的準(zhǔn)備(如何為微生物保藏物做準(zhǔn)備?)

4,、預(yù)凍(如何為物質(zhì)做預(yù)凍處理?)

5,、保藏

將安瓿管或塑料凍存管置于液氮罐中保藏。一般氣相中溫度為-150 ℃,，液相中溫度為-196℃,。

6、復(fù)蘇方法

液氮罐中取出安瓿管或塑料凍存管,，應(yīng)立即放置在38 ℃～40 ℃水浴中快速?gòu)?fù)蘇并適當(dāng)搖動(dòng),。直到內(nèi)部結(jié)冰全部溶解為止,，一般約需50 s～100 s。開(kāi)啟安瓿管或塑料凍存管,，將內(nèi)容物移至適宜的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),。

*后，通過(guò)操作,，根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)體會(huì),，比較幾種菌種保藏方法的利弊，做出*終的答案,。特別提醒大家在操作時(shí)一定要注重自身安全,，做好防護(hù)措施。查特杜瓦瓶