細胞凍存液氮罐使用過程中需要注意些啥 查特杜瓦瓶 凍存細胞復(fù)蘇的操作步驟 (1)佩戴眼鏡和手套,從液氮罐中取出安瓿或冷凍管,。 (2)迅速放入38℃水浴中,,并不時搖動,在1分鐘
細胞凍存液氮罐使用過程中需要注意些啥
查特杜瓦瓶
凍存細胞復(fù)蘇的操作步驟
?。?)佩戴眼鏡和手套,,從液氮罐中取出安瓿或冷凍管。
?。?)迅速放入38℃水浴中,,并不時搖動,在1分鐘內(nèi)使其完全融化,,然后在無菌下取出細胞,。
(3)在1000r/min速度下離心5~10分鐘,,棄去上層液,,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,接種濃度1×109/L,,置37℃溫箱靜置培養(yǎng),,次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),,觀察生長情況,。若細胞密度較高,及時傳代?;驘o需離心直接將細胞加入瓶中,,并加入培養(yǎng)基貼壁培養(yǎng)12~24小時后,充去上清,,換入新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。
細胞凍存
液氮罐一般可分為液氮貯存罐、液氮運輸罐兩種,。貯存罐主要用于室內(nèi)液氮的靜置貯存,
液氮罐不宜在工作狀態(tài)下作遠距離運輸使用,;液氮運輸罐為了滿足運輸?shù)臈l件,,做了專門的防震方面的設(shè)計。其除可靜置貯存外物品外,,還可在充裝液氮狀態(tài)下,,作為運輸使用,但是也應(yīng)避免劇烈的碰撞和震動,。
1.罐子在使用過程中,,每天都應(yīng)隨時檢查罐子的使用情況,在罐子內(nèi)有液氮的前提下,,發(fā)現(xiàn)罐子瓶蓋上和上部有水珠或結(jié)霜情況,,說明罐子質(zhì)量有問題,應(yīng)立即停止使用,;
2.在罐子瓶蓋上和上部無水珠或結(jié)霜現(xiàn)象時,,用手觸摸外殼,感覺上部冷,,下部熱,,說明罐子質(zhì)量有一些問題,即液氮日增損較大,,應(yīng)注意觀察,,防止液氮耗損完后,所貯存的物質(zhì)損壞,,必要時,,好停止使用;若上下溫度一致,,說明罐子質(zhì)量沒有問題,。
3.打開瓶塞后,瓶口內(nèi)的霧氣不往外溢,,而往下沉,,說明罐子是好的。
4.用耳朵從瓶口處聽罐子內(nèi)是否有氣泡聲,如較頻繁則罐子質(zhì)量有問題,,反之則無問題,。
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