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細(xì)胞凍存液氮罐的具體操作步驟和細(xì)胞復(fù)蘇流程

時間:2020-05-08 09:27來源: 作者:ydgmve2020yyx 點擊:
大量細(xì)胞如何儲存在液氮罐里,,液氮罐里一般灌有低溫液氮,細(xì)胞的儲存需要低溫環(huán)境,,放入-196度的液氮里對細(xì)胞是長期保存的一個適合的環(huán)境,。細(xì)胞凍存液氮罐是將細(xì)胞存入液氮罐的
大量細(xì)胞如何儲存在液氮罐里,液氮罐里一般灌有低溫液氮,,細(xì)胞的儲存需要低溫環(huán)境,,放入-196度的液氮里對細(xì)胞是長期保存的一個適合的環(huán)境。細(xì)胞凍存液氮罐是將細(xì)胞存入液氮罐的液相里儲存,,有專用的方形抽屜式提籃,,2ml凍存管放入凍存盒然后再放入提籃后浸入液氮里,完全浸入,。使細(xì)胞完全處于液氮-196度環(huán)境下,,才能夠長期保存細(xì)胞,。  查特液氮罐
細(xì)胞凍存液氮罐的具體操作步驟:  
    1、培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中細(xì)胞按常規(guī)方法消化,,或分離獲得原代細(xì)胞后,,收集于離心管中。  
    2,、使用離心機離心,,去除上清,收集細(xì)胞沉淀,。  
    3,、根據(jù)細(xì)胞生長密度加入適量的LiveCyteTM細(xì)胞凍存液進(jìn)行重懸,充分混勻,。  
    4,、將細(xì)胞懸液分裝至凍存管中,直接放置于-80°C冰箱保存,。24小時后可移入液氮長期保存(可選),。  
細(xì)胞凍存液氮罐的細(xì)胞復(fù)蘇流程:  
    1、從-80°C冰箱或液氮罐中取出細(xì)胞,。  
    2,、迅速放入37°C水浴,并不時搖動,,在3分鐘之內(nèi)使其完全融化,。  
    3、在凍存管中加入少量完全培養(yǎng)基,,再將細(xì)胞混合液移入含有該細(xì)胞完全培養(yǎng)基的離心管中,,樣品和培養(yǎng)基比例為1:10,然后輕輕吹打,,混合均勻,。  查特液氮罐
    4、離心后去除上清,,收集細(xì)胞沉淀,。  
    5、輕輕彈松細(xì)胞沉淀,,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,,輕輕晃動使細(xì)胞分布均勻,置于37℃孵箱中培養(yǎng),。
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