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細胞凍存液氮罐的具體操作步驟和細胞復蘇流程

時間:2020-05-08 09:27來源: 作者:ydgmve2020yyx 點擊:
大量細胞如何儲存在液氮罐里,,液氮罐里一般灌有低溫液氮,,細胞的儲存需要低溫環(huán)境,放入-196度的液氮里對細胞是長期保存的一個適合的環(huán)境,。細胞凍存液氮罐是將細胞存入液氮罐的
大量細胞如何儲存在液氮罐里,,液氮罐里一般灌有低溫液氮,細胞的儲存需要低溫環(huán)境,放入-196度的液氮里對細胞是長期保存的一個適合的環(huán)境,。細胞凍存液氮罐是將細胞存入液氮罐的液相里儲存,,有專用的方形抽屜式提籃,2ml凍存管放入凍存盒然后再放入提籃后浸入液氮里,,完全浸入,。使細胞完全處于液氮-196度環(huán)境下,才能夠長期保存細胞,。  查特液氮罐
細胞凍存液氮罐的具體操作步驟:  
    1,、培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中細胞按常規(guī)方法消化,或分離獲得原代細胞后,,收集于離心管中,。  
    2、使用離心機離心,,去除上清,,收集細胞沉淀。  
    3,、根據細胞生長密度加入適量的LiveCyteTM細胞凍存液進行重懸,,充分混勻。  
    4,、將細胞懸液分裝至凍存管中,,直接放置于-80°C冰箱保存。24小時后可移入液氮長期保存(可選),。  
細胞凍存液氮罐的細胞復蘇流程:  
    1,、從-80°C冰箱或液氮罐中取出細胞。  
    2,、迅速放入37°C水浴,,并不時搖動,在3分鐘之內使其完全融化,。  
    3,、在凍存管中加入少量完全培養(yǎng)基,再將細胞混合液移入含有該細胞完全培養(yǎng)基的離心管中,,樣品和培養(yǎng)基比例為1:10,然后輕輕吹打,,混合均勻,。  查特液氮罐
    4、離心后去除上清,,收集細胞沉淀,。  
    5、輕輕彈松細胞沉淀,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,,輕輕晃動使細胞分布均勻,,置于37℃孵箱中培養(yǎng)。
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