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精子活力測(cè)定方法

時(shí)間:2019-09-10 09:27來源: 作者:ydgmve2020yyx 點(diǎn)擊:
以過濾海水(水溫15℃,、pH8.1,、鹽度27%)為激活液(下同),精液與激活液混合后在顯微鏡下觀察精子活力(激活率,、活動(dòng)時(shí)間和壽命),。激活率為給定視野中被激活精子的數(shù)量占全部精
以過濾海水(水溫15℃,、pH8.1,、鹽度27%)為激活液(下同),,精液與激活液混合后在顯微鏡下觀察精子活力(激活率、活動(dòng)時(shí)間和壽命),。激活率為給定視野中被激活精子的數(shù)量占全部精子數(shù)量的百分比;運(yùn)動(dòng)時(shí)間是指精子自激活開始至90%的精子原地顫動(dòng)為止所經(jīng)歷的時(shí)間,;精子的壽命指精子從激活開始至90%的精子停止運(yùn)動(dòng)的時(shí)間,。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。
稀釋液種類對(duì)精子超低溫冷凍保存效果的影響試驗(yàn)分別以HBSS,、MPRS,、Cortland液為稀釋液(如表一),以10%EG為抗凍劑(抗凍劑為終濃度,,下同)配制抗凍液,;將精液與抗凍液按1︰3比例混勻,4℃平衡30min,;將平衡后的精液-抗凍液混合物分裝入0.25mL麥細(xì)管中,,然后用兩步降溫法(即將盛精麥細(xì)管平放在自制簡(jiǎn)易降溫裝置的液氮面上7.5cm處,停留10min后投入液氮中)保存,。12h后,,將麥細(xì)管從液氮中快速取出,于40℃水浴中溶化后檢測(cè)精子激活率,。MVE液氮罐


稀釋比例對(duì)精子超低溫冷凍保存效果的影響試驗(yàn)以10%EG為抗凍劑,、Cortland液為稀釋液配制抗凍液,將精液與抗凍液按1:1,、1:2,、1:3、1:4,、1:5,、1:7、1:9混勻,按前文方法冷凍保存精子及解凍與激活率檢測(cè),。
抗凍劑種類及濃度對(duì)精子超低溫冷凍保存效果的影響試驗(yàn)以5%,、10%、15%及20%四個(gè)濃度的DMSO,、Gly,、EG、PG為抗凍劑,、Cortland液為稀釋液配制抗凍液,,將精液與抗凍液按1︰3混勻,然后冷凍保存精子及解凍與活力檢測(cè),。MVE液氮罐
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