牛精液冷凍保存是將精液進(jìn)行特殊處理,,保存在超低溫下,,以達(dá)到長(zhǎng)期保存的目的。通常采用液氮(-196℃)和干冰(-79℃)保存,。 MVE液氮罐 牛精液冷凍保存的優(yōu)點(diǎn):使用不受時(shí)間,、地域以及
牛精液冷凍保存是將精液進(jìn)行特殊處理,保存在超低溫下,,以達(dá)到長(zhǎng)期保存的目的,。通常采用液氮(-196℃)和干冰(-79℃)保存。
MVE液氮罐
牛精液冷凍保存的優(yōu)點(diǎn):使用不受時(shí)間,、地域以及種用雄性動(dòng)物壽命的限制,。可充分提高利用率,。
低溫保存細(xì)胞的原理,,冷凍保護(hù)劑可以均勻充分地和細(xì)胞相接觸,保護(hù)效果好,。對(duì)組織而言,,保護(hù)劑只能作用于其表面,對(duì)深層細(xì)胞無法起到保護(hù)作用,。為了提高組織的存活率,,應(yīng)同時(shí)控制降溫的速率??刂平禍厮俾实穆俳禍乜梢允辜?xì)胞外溶液中的水結(jié)冰,,導(dǎo)致細(xì)胞外溶液濃度升高,胞內(nèi)水向膜外滲出,,在達(dá)到一定溫度時(shí),,將組織置于灤低溫冰箱或液氮中凍存,可以減輕細(xì)胞內(nèi)結(jié)晶對(duì)細(xì)胞的損傷,,保持細(xì)胞的活性,。
冷凍
在裝有液氮的容器上置一銅紗網(wǎng),,距液氮面2厘米左右。將平衡后的精液用滴管按一定量滴于銅紗網(wǎng),,滴完最后一滴停3分鐘~5分鐘,,當(dāng)精液顆粒顏色變白時(shí),立即浸入液氮,,并將全部顆粒取下,,收集于儲(chǔ)精瓶或紗網(wǎng)布袋內(nèi),并做好標(biāo)記,,然后立即移入液氮罐中儲(chǔ)存,。
解凍
將預(yù)先配制好的9%檸檬酸的溶液1毫升,放入干凈的小試管中,,再置于40℃左右的溫水杯中,,迅速取顆粒冷凍精液1粒放入試管。輕輕搖動(dòng)至化凍時(shí),,從水杯中取出試管,,接著檢查精液活力,即為合格品,。
重視保精,、快速解凍與鏡檢
1、根據(jù)液氮罐的性能要求,,定期添加液氮,,罐內(nèi)盛裝凍精的提筒不能露在液氮外面。
2,、取精時(shí),,盡可能用長(zhǎng)鑷子,切勿將提筒或紗布袋提到臨界線以上處(罐頂10厘米左右),。
3,、從液氮中取出細(xì)管凍精時(shí),要輕輕甩一兩下,,將塑料細(xì)管的棉塞端放入35℃~40℃的溫水中,,把封口端留在水外3厘米外,待管內(nèi)精液融化一半時(shí),,立即取出備用,。
4、解凍后的精液鏡檢時(shí),,精子的活力不低于標(biāo)準(zhǔn)方可用于輸精,,才能確保正常受精。
5,、解凍后的精液應(yīng)立即輸配,,不宜停放時(shí)間過長(zhǎng),,應(yīng)做到現(xiàn)解凍,現(xiàn)輸精,。
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