乳雙歧桿菌U9是一株具有優(yōu)良益生功能的乳桿菌,。為了保證U9菌株活性,，為工業(yè)化益生菌制劑生產(chǎn)提供穩(wěn)定菌種，利用液氮深冷方式對(duì)U9菌株進(jìn)行冷凍保藏,。以冷凍存活率為評(píng)價(jià)指標(biāo),，對(duì)冷凍保護(hù)劑種類進(jìn)行篩選，并對(duì)保護(hù)劑配方進(jìn)行正交試驗(yàn)優(yōu)化,。結(jié)果表明,，甘油、海藻糖,、脫脂乳粉及維生素C4種保護(hù)劑能對(duì)乳雙歧桿菌U9起到良好的保護(hù)作用;正交試驗(yàn)優(yōu)化確定的保護(hù)劑配方為甘油2%,、海藻糖7.5%、脫脂乳粉7.5%,、維生素C 0.1%,，菌體冷凍后存活率達(dá)到94%。MVE液氮罐

乳雙歧桿菌是人體腸道中常見(jiàn)的益生菌,，也是世界上被廣泛研究的益生菌菌種之一,，在維護(hù)人體健康中扮演重要角色。據(jù)統(tǒng)計(jì),，有300多種科學(xué)出版物都對(duì)乳雙歧桿菌功能特性進(jìn)行了描述,，其中130多種報(bào)道涉及其人體臨床研究。大量報(bào)道表明,，乳雙歧桿菌的保健作用已經(jīng)在許多胃腸健康和免疫功能臨床研究中得到了驗(yàn)證,。目前，人們已經(jīng)把乳雙歧桿菌制備成了發(fā)酵乳制品的直投發(fā)酵劑、膳食補(bǔ)充劑以及藥用制劑等,。

在乳雙歧桿菌工業(yè)化使用過(guò)程中,，菌種活力的保持與工業(yè)化生產(chǎn)緊密相關(guān)。傳統(tǒng)的保菌方式主要是采用真空冷凍干燥的方法,，但存在設(shè)備成本較高,、菌種存活率低等問(wèn)題。

因此,，探究一種更為簡(jiǎn)便的保菌方式顯得尤為重要,。液氮深冷保菌方式因其實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)便、成本較低,、菌種活力高等優(yōu)勢(shì)，越發(fā)廣泛地應(yīng)用到菌種保藏中,。有研究采用3%甘油,、5%海藻糖、5%果糖,、8%脫脂乳,、0.05%維生素C、0.05%L-谷氨酸(L-GLU)作為保護(hù)劑配方,，對(duì)長(zhǎng)雙歧桿菌起到良好保護(hù)作用,，保證在深冷條件下存活率接近100%。針對(duì)不同菌株研究特異性冷凍保護(hù)劑是菌株深冷保藏的關(guān)鍵,。

冷凍保護(hù)劑分為滲透型,、非滲透型、半滲透型和抗氧化型4種,，不同類型保護(hù)劑的保護(hù)機(jī)制也不同,。MVE液氮罐

液氮深冷冷凍技術(shù)，能耗小,，安全性高,，生產(chǎn)成本低，能較好地提升菌種的存活率,，為菌種的保藏提供了更有效便捷的方式,。冷凍保藏效果的關(guān)鍵在于冷凍保護(hù)劑的選擇，通過(guò)對(duì)保護(hù)劑種類進(jìn)行篩選,，確定了甘油,、海藻糖、脫脂乳粉和維生素C4種保護(hù)劑,，它們能夠?qū)θ殡p歧桿菌U9在液氮中的冷凍保藏起到良好的保護(hù)作用,，并借助正交試驗(yàn)及驗(yàn)證試驗(yàn)對(duì)保護(hù)劑濃度進(jìn)行優(yōu)化，確定保護(hù)劑配方為2%甘油、7.5%海藻糖,、7.5%脫脂乳粉,、0.1%維生素C。利用優(yōu)化后的保護(hù)劑配方對(duì)乳雙歧桿菌U9進(jìn)行凍干保護(hù),，存活率可達(dá)94%,，為乳雙歧桿菌U9在工業(yè)化生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。